Determinación del potencial inhibitorio de la fracción alcaloidal de Psychotria pilosa sobre xantina oxidasa y radical superóxido mediante autografía.

La investigación tuvo como objetivo determinar el potencial inhibitorio de la fracción alcaloidal de P. pilosa sobre xantina oxidasa y radical superóxido mediante autografía. Se obtuvo el extracto alcaloidal de las hojas de P. pilosa a partir de una maceración con metanol, posterior el uso de solven...

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Autore principale: Machado Valle, Mishell Karolina (author)
Natura: bachelorThesis
Lingua:spa
Pubblicazione: 2019
Soggetti:
Accesso online:https://dspace.espoch.edu.ec/handle/123456789/13445
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Descrizione
Riassunto:La investigación tuvo como objetivo determinar el potencial inhibitorio de la fracción alcaloidal de P. pilosa sobre xantina oxidasa y radical superóxido mediante autografía. Se obtuvo el extracto alcaloidal de las hojas de P. pilosa a partir de una maceración con metanol, posterior el uso de solventes orgánicos (éter etílico y acetato de etilo) y cambios de pH, alcanzando un rendimiento de 0.07%. El estudio se realizó a diferentes concentraciones de la fracción alcaloidal (1, 10, 50, 100 µg) usando metanol como disolvente. Las pruebas autográficas se desarrollaron en placas de TLC de 6 x 4 cm, mediante la técnica “dot blot”, se sembraron aproximadamente 10 µL de cada solución de alcaloides totales. Al evaluar la actividad antioxidante de P. pilosa mediante el método DPPH• se utilizó como referencia ácido ascórbico. Para determinar la capacidad captadora de radicales superóxido se emplearon los modelos: riboflavina, luz, nitroazul de tetrazolio (NBT) y NADH, metosulfato de fenazina (PMS), nitroazul de tetrazolio (NBT), en los dos métodos el estándar usado fue taxifolina; mientras que para evaluar el potencial inhibitorio de xantina-oxidasa se usó xantina como sustrato y alopurinol fue el control positivo; es así que estos métodos ayudaron a discriminar entre un inhibidor puro de XO y un captador de O_2^(∙ -). La cromatografía en capa fina (TLC) se llevó a cabo usando como fase móvil cloroformo/ trietilamina/metanol en proporciones (6:0.5:0.6) y revelado sin tratamiento químico a 254 nm. Los datos cualitativos y cuantitativos se reflejaron en la intensidad del color y los diámetros de los halos respectivamente; el programa GelAnalyzer fue usado para obtener los resultados de las áreas de inhibición. Los resultados mostraron que la fracción alcaloidal de P. pilosa posee capacidad captadora de radical superóxido para los sistemas B2/luz/NBT y NADH/PMS/NBT, en contraposición no presenta inhibición de xantina-oxidasa. Se recomienda realizar estudios de elucidación estructural de los alcaloides mediante técnicas cromatográficas y espectroscópicas.