Determinación de la inhibición de la actividad enzimática del veneno de dos especies de serpientes (Bothrops asper, Bothrocophias microphthalmus) POR Piptocoma discolor

La investigación buscó determinar la capacidad inhibitoria del extracto de Piwi (Piptocoma discolor) en la actividad enzimática del veneno de las serpientes Bothrops asper y Bothrocophias microphthalmus. Para simular las condiciones del cuerpo humano, se utilizaron concentraciones de 10 mg de las to...

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Hlavní autor: Castillo Mora, Jennifer Gabriela   (author)
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Vydáno: 2022
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description La investigación buscó determinar la capacidad inhibitoria del extracto de Piwi (Piptocoma discolor) en la actividad enzimática del veneno de las serpientes Bothrops asper y Bothrocophias microphthalmus. Para simular las condiciones del cuerpo humano, se utilizaron concentraciones de 10 mg de las toxinas liofilizadas disueltas en un buffer de potasio fosfato monobásico y potasio fosfato dibásico. Se midió la actividad de la hialuronidasa utilizando el sustrato ácido hialurónico, resolviendo la turbidez con el bromuro de cetil-trimetil amonio. Para determinar la fosfolipasa, se midió el tiempo de coagulación con una emulsión lipoproteica de yema de huevo con Tris-HCl y cloruro de calcio. La actividad caseinolítica se midió utilizando caseína y se midió la absorbancia después de precipitarla con ácido tricloroacético. La actividad coagulante se midió utilizando fibrinógeno, y se incubó antes de medir el tiempo de coagulación. Además, se cuantificaron las proteínas presentes en las toxinas utilizando los métodos de Lowry y Folin-Ciocalteu. Los resultados mostraron que el extracto seco de la corteza de Piptocoma discolor tuvo una mayor capacidad inhibitoria sobre la actividad enzimática del veneno de ambas serpientes, en comparación con el suero antiofídico. En particular, se observó una mayor inhibición de la hialuronidasa y la caseinolítica en las toxinas de ambas especies, el extracto también tuvo un efecto inhibidor sobre la actividad coagulante, lo que permitió frenar el tiempo de coagulación. Sin embargo, se encontró una discrepancia en la inhibición de la fosfolipasa A2, ya que esta enzima fue más inhibida en presencia del suero antiofídico. En conclusión, el extracto de Piptocoma discolor tuvo un efecto similar al suero antiofídico en la actividad caseinolítica, hialuronidasa y coagulante. Se recomienda realizar más investigaciones sobre el árbol Piptocoma discolor para evaluar su capacidad inhibidora en las enzimas presentes en las toxinas de las diferentes familias de serpientes venenosas del país.
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Para determinar la fosfolipasa, se midió el tiempo de coagulación con una emulsión lipoproteica de yema de huevo con Tris-HCl y cloruro de calcio. La actividad caseinolítica se midió utilizando caseína y se midió la absorbancia después de precipitarla con ácido tricloroacético. La actividad coagulante se midió utilizando fibrinógeno, y se incubó antes de medir el tiempo de coagulación. Además, se cuantificaron las proteínas presentes en las toxinas utilizando los métodos de Lowry y Folin-Ciocalteu. Los resultados mostraron que el extracto seco de la corteza de Piptocoma discolor tuvo una mayor capacidad inhibitoria sobre la actividad enzimática del veneno de ambas serpientes, en comparación con el suero antiofídico. En particular, se observó una mayor inhibición de la hialuronidasa y la caseinolítica en las toxinas de ambas especies, el extracto también tuvo un efecto inhibidor sobre la actividad coagulante, lo que permitió frenar el tiempo de coagulación. Sin embargo, se encontró una discrepancia en la inhibición de la fosfolipasa A2, ya que esta enzima fue más inhibida en presencia del suero antiofídico. En conclusión, el extracto de Piptocoma discolor tuvo un efecto similar al suero antiofídico en la actividad caseinolítica, hialuronidasa y coagulante. Se recomienda realizar más investigaciones sobre el árbol Piptocoma discolor para evaluar su capacidad inhibidora en las enzimas presentes en las toxinas de las diferentes familias de serpientes venenosas del país.The research pretended to determine the inhibitory capacity of Piwi extract (Piptocoma discolor) on the enzymatic activity of the poison of Bothrops asper and Bothrocophias microphthalmus snakes. To simulate human body conditions, 10 mg concentrations of the lyophilized toxins dissolved in monobasic potassium phosphate and dibasic potassium phosphate buffer were used. Hyaluronidase activity was measured using the substrate hyaluronic acid resolving turbidity with cetyl trimethyl ammonium bromide. To determine phospholipase, clotting time was measured with an egg yolk lipoprotein emulsion with Tris-HCl and calcium chloride. Caseinolytic activity was measured using casein, and absorbance was measured after precipitation with trichloroacetic acid. Coagulant activity was measured using fibrinogen, and it was incubated before clotting time was measured. In addition, proteins present in the toxins were quantified using the Lowry and Folin-Ciocalteu methods. The results showed that the dried extract of Piptocoma discolor peel had a higher inhibitory capacity on the enzymatic activity comparing the poison of both snakes. This is compared to the antiphidic serum. In particular, greater inhibition of hyaluronidase and caseinolytic was observed in the toxins of both species. The extract also had an inhibitory effect on the coagulant activity, which allowed slowing down the coagulation time. However, a discrepancy was found in the inhibition of phospholipase A2 as this enzyme was more inhibited in the presence of the antiphidic serum. In conclusion, Piptocoma discolor peel extract had a similar effect to antiophidic serum on caseinolytic, hyaluronidase, and coagulant activity. Further research on Piptocoma discolor tree is recommended to evaluate its inhibitory capacity on the enzymes present in the toxins of different families of the snakes’ poison in the country.Escuela Superior Politécnica de ChimborazoVinueza Tapia, Diego RenatoVinueza Tapia, Diego Renato2024-06-24T18:16:07Z2025-06-19T05:45:22Z2022-08-11info:eu-repo/semantics/bachelorThesisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionapplication/pdfCastillo Mora, Jennifer Gabriela. (2022). Determinación de la inhibición de la actividad enzimática del veneno de dos especies de serpientes (Bothrops asper, Bothrocophias microphthalmus) POR Piptocoma discolor. Escuela Superior Politécnica de Chimborazo. Riobambahttps://dspace.espoch.edu.ec/handle/123456789/21748spaUDCTFC;56T01296info:eu-repo/semantics/openAccesshttps://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/ec/reponame:Repositorio Escuela Superior Politécnica de Chimborazoinstname:Escuela Superior Politécnica de Chimborazoinstacron:ESPOCH2025-06-19T05:45:22Zoai:dspace.espoch.edu.ec:123456789/21748Institucionalhttp://dspace.espoch.edu.ec/Universidad públicahttps://www.espoch.edu.ec/es/http://dspace.espoch.edu.ec/oai.Ecuador...opendoar:17502025-06-19T05:45:22Repositorio Escuela Superior Politécnica de Chimborazo - Escuela Superior Politécnica de Chimborazofalse
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