Detección molecular del virus de la fiebre aftosa en muestras de ganado infectado y utilización del sistema Bac to Bac para la construcción de baculovirus recombinantes con genes inmunogénicos

 

Authors
Palacios Orellana, Daniel Alfredo
Format
BachelorThesis
Status
publishedVersion
Description

The Foot and Mouth disease virus belongs to the Picornavirus family and primarily affects to bovine, ovine, porcine and caprine. The virus is divided in seven serotypes, O, A, C, Sat1, Sat2, Sat3 and Asia1. In Latin America, the most prevalent serotypes are O and A, in Ecuador, serotype O is the most common. Currently, the vaccine in use is that of an inactivated virus that has some disadvantages such as a limited immune response, the need for a cold chain to keep the vaccine functional and the need of a great quantity of virus to manufacture it. An alternative to overcome these inactivated vaccine’s problems is the creation of subunit vaccines using a recombinant protein expression system, where only the immunogenic components of the pathogen are used. Therefore, this project’s main objective is the application of a Bac-to-Bac system for the construction of recombinant baculovirus with the foot and mouth disease virus’ highly immunogenic capsid genes such as VP1, P1-2A and 3C from serotype O. Recombinant baculoviruses were obtained with the VP1 construct and these will be later transfected in insect cells for the expression and analysis of VP1 as a possible candidate for a subunit vaccine.
El virus de la fiebre aftosa pertenece a la familia de los Picornavirus y es un virus que afecta mayormente a animales bovinos, ovinos, porcinos y caprinos. Se divide en 7 serotipos: O, A, C, Sat1, Sat2, Sat3 y Asia1. En Latinoamérica, los serotipos más prevalentes son el O y A, en Ecuador, el serotipo de mayor incidencia es el O. La vacuna que se utiliza actualmente es una vacuna convencional de virus inactivado que posee algunas desventajas como una respuesta inmune limitada, la necesidad de una cadena de frío para mantener a la vacuna viable y el requerimiento de grandes cantidades de virus para fabricarla. Una alternativa para sobrepasar estos problemas y en general los problemas de las vacunas convencionales, es la creación de subunidades de vacunas por medio de un sistema de expresión de proteínas recombinantes, dónde se utiliza sólo las proteínas inmunogénicas del patógeno. Por lo tanto, este proyecto se centró en la aplicación del sistema Bac-to-Bac para la construcción de baculovirus recombinantes con genes de la cápside, altamente inmunogénicos, del virus de la fiebre aftosa como son VP1, P1-2A y 3C del serotipo O. Se logró obtener baculovirus recombinantes con el constructo VP1 y éstos, posteriormente, serán transfectados en células de insectos para la expresión y análisis de VP1 como un posible candidato de subunidad de vacuna.

Publication Year
2013
Language
esp
Topic
Biotecnología
Fiebre aftosa
MICROBIOLOGÍA
Repository
Repositorio Universidad San Francisco de Quito
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http://repositorio.usfq.edu.ec/handle/23000/2229
Rights
openAccess
License
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/ec/